会议速递｜WHY?HOW?鲁凤民教授深入解析新标志物血清HBV RNA临床价值
2024-12-05
11月28日，由河南省医学会临床检验管理分会主办、郑州大学第一附属医院承办的“河南省医院协会临床检验管理分会2024年会暨河南省临床检验中心临床检验室间质量评价总结会”在河南省郑州市嵩山饭店隆重召开。
本次会议授课专家芸集，在实验室能力建设方面主题论坛中， 北京大学基础医学院鲁凤民教授做了《从pgRNA病毒样颗粒的产生看HBV新标识血清RNA的临床应用》主题报告，报告以“我国慢性乙型肝炎患者诊治的成就与挑战”内容展开，乙型肝炎病毒的发现、病毒学特征；乙型肝炎病毒感染后的阶段性疾病进展及结局；HBV 的感染复制周期及核苷（酸）类药物（NAs）抗病毒治疗的靶点；在接受NA治疗的患者中，HCC发生风险仅降低~50%, 并未完全消除；新版指南（2022）扩大抗病毒治疗后，我国92%的慢性感染者将得到治疗；临床治愈可显著改善慢性乙肝患者（慢性HBV感染者、HBV相关肝癌患者）远期不良结局；我们处在核苷（酸）类药物为主要治疗药物的抗病毒时代，获得完全病毒学应答的患者，仍有较高的HCC发生风险。
关于HBV RBA病毒样颗粒的发现、血清HBV RNA的产生路径、存在形式、来源和特点等做了详细阐述，同时分享国内肝病领域张文宏研究团队等工作成果，血清HBV RNA水平反映肝内cccDNA的转录活性，血清 HBV pgRNA，是NA治疗下HBV DNA ＜ LLOQ后，能够反映患者肝组织内是否有cccDNA活跃转录的唯一指标。
鉴于当下“核苷（酸）类药物抗病毒时代，亟需新的血清病毒标志物”背景，鲁凤民教授在报告中着重指出，NA治疗下患者血清HBV DNA消失后，血清pgRNA检测可反映cccDNA的转录活性，cccDNA的存在是乙肝感染持续、停药后复发及慢性乙肝难以治愈的主要原因。 cccDNA以微小染色体形式存在于感染肝细胞核内，结构稳定难以清除，而肝组织cccDNA的检测需要有创的肝穿刺活检，病人接受度不高，无法广泛开展，因此临床亟需能够反映肝组织内cccDNA存在及转录活性度血液替代指标。
当前常用的病毒学指标HBsAg的来源除了cccDNA以外还有整合HBV DNA片段，只有3.5kb超基因组长度的preC mRNA和pgRNA仅可转录自cccDNA，因而能反映cccDNA的指标为pgRNA和HBcrAg。
对于新标志物血清HBV RNA的临床应用，需明确两个重要问题，一是为何要用，二是如何用。关于此部分内容，鲁凤民教授做了深入详致的分享阐述。
新标志物血清HBV RNA为何要用？
我们为何要定量检测血清中的HBV DNA？反映慢性感染和源自cccDNA的病毒DNA复制是否活跃；NA治疗下源自cccDNA的pgRNA逆转录合成子代病毒DNA的过程是否被抑制；NA治疗下DNA合成被完全抑制，即患者血清HBV DNA＜LLOQ，但不等于cccDNA的消失，如何监测？
因而我们需要新型标志物HBV RNA，在NA治疗下患者血清HBV DNA检测不到后，通过HBV RNA检测反映cccDNA转录活性。
另外，鉴于血清HBV RNA的存在形式 ---慢性HBV感染者血清中的HBV RNA很复杂，既来自病毒复制过程(cccDNA)，也来自整合 HBV DNA的转录，鲁凤民教授分享指出应排除干扰建立最灵敏的检测技术。鲁教授团队已发表“标准化血清HBV RNA检测方法的建立”研究成果，且中国食品药品检定研究院已经研制出“乙型肝炎病毒RNA 检测试剂国家标准品”，适用于HBV RNA 定量检测试剂盒的质量评价。血清HBV RNA检测的溯源与标准化，以确保检测试剂的质量及不同试剂可比性。
新标志物血清HBV RNA如何用？
作为新指标应用临床关切的重点内容，鲁凤民教授在报告中提出HBV RNA三大应用场景。
场景1--- HBV RNA、或联合HBsAg预测NA停药后的病毒学复发。
★ HBV RNA联合HBsAg，预测停药后病毒学复发风险效果最优。
场景2--- DNA转阴后，HBV RNA可持续提示疗效。
★ HBV DNA阴性患者中，RNA仍有相当比例阳性，且随治疗时间逐步转阴。
★ 用于低病毒血症及DNA阴性患者抗病毒疗效监测；HBV RNA可填补HBV DNA监测盲区，HBV DNA转阴后可持续提示疗效，HBV RNA持续阳性，提示治疗效果欠佳。
场景3--- 血清HBV RNA预测NA 治疗患者的肝细胞癌发生风险。
★ 血清HBV RNA水平与CHB患者肝脏炎症活动度和肝纤维化分期均相关。
★ NA治疗下的持续血清HBV RNA阳性与HCC进展相关，RNA阳性或较高水平，HCC累积复发率越高，总生存率越低。
★今后，从过去单一的控制HBV DNA到控制HBV DNA+ HBV RNA降低HCC发生风险将成为一种应用趋势。
报告最后，鲁凤民教授对血清HBV RNA 定量检测当前存在的问题与展望进行了总结。
检测方面：血清HBV RNA 定量检测的下限（灵敏度）有待进一步提高；尚无国际标准品，血清HBV RNA 定量的量值溯源及国际标准化是亟待解决的问题。
临床应用方面：指导安全停药；NA治疗下患者血清HBV RNA检测阳性预示更高的HCC发生风险；NA治疗下患者血清HBV RNA检测阳性，提示病毒cccDNA仍在有效转录表达病毒蛋白、组装子代病毒颗粒样pgRNA病毒颗粒。
卫生经济学方面：在充分发挥其诊断和疗效评估价值的同时，最大限度降低患者和社会的经济负担。
PS：北京大学拥有血清HBV RNA定量检测（荧光探针法）专利，通过北京大学专利实施许可，与Z6·尊龙凯时「中国」官方网站生物联合研发的国际上首个乙肝病毒前基因组RNA荧光定量检测试剂盒已上市。
